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重組賴氨酰內切酶(生化級)
日期:2018-09-29    瀏覽次數:

Gebiotide®重組賴氨酰內切酶(生化級)

產品簡介

賴氨酰內切酶(LaiAnXianNeiQieMei)又稱賴氨酰肽鏈內切酶Lys-C 內切酶,是一種絲氨酸蛋白酶, 最初由Masaki等人從土壤細菌中發現并分離得到。該酶具有高度特異性,可特異性切割賴氨酸殘基和 S-氨乙 基半胱氨酸殘基羧基端的肽鍵。也有報道稱具有微量的非特異性切割。該酶是蛋白質序列分析和生物制品生產 中非常珍貴的工具酶。該酶可單獨使用,也可以與其它蛋白酶一起使用,經過消化的蛋白可用于肽圖譜分析以 及目的蛋白的制備。 本品是從重組大腸桿菌中分離純化,再經冷凍干燥得到的重組賴氨酰內切酶粉末。

本品屬于生物化學級別 的基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有天然賴氨酰內切酶相同的活力和特異性。



產品優勢

|無動物源性:無動物病毒、無致病物質、無外源因子污染,安全性高。 

|純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。 

|生產規模 1000L 以上。 

|合規性:生產設備和生產環境符合相關法規要求,符合 GMP 指導原則。 

|質量文件完整:按客戶需求,可提供相關法規支持文件。



- 產品特性


性狀

白色或類白色凍干粉

酶比活性

≥3.0AU/mg pro.

分子量 29.2 kDa±2.9kDa

單一主條帶(SDS-PAGE)

蛋白含量 30%~70%
外源 DNA 殘留量
≤100ng/mg pro.
菌體蛋白殘留量
≤100ng/mg pro.

最佳pH

8.5~9.5

溶解性 在緩沖液中溶解性良好 

酶活定義: 30℃, pH9.5 條件下,每分鐘催化底物生成 1μmol 對硝基苯胺的酶量為 1AU。


- 推薦使用方法

【蛋白質的準備】 

將蛋白質溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質可以用最小體積的 變性劑,如 8M 尿素或 6M 鹽酸胍,在 25℃~37℃條件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質 可以加入終濃度為 5mM 的 DTT 或β-巰基乙醇,于 50~60℃孵育 20 分鐘使之溶解。 調整反應溶液體積使 Tris-HCl 為 25mM,尿素為 1M 或更低,鹽酸胍為 0.1M 或更低。 

【酶液準備】 

稱取所需的酶粉,用 25mM Tris-HCl (pH 9.2)溶解,使酶液濃度為 1-10mg/ml。 

【消化反應】

 1g 多肽或蛋白質推薦酶的用量在 1~100AU 之間。推薦于-15℃及以下反應 2~18h。 如果需要終止反應,可以加入乙酸或鹽酸調節 pH 至酸性。

【注意】 為了獲得最佳的酶切效果,通常需要蛋白處于可溶、變性和二硫鍵還原的狀態,否則需要加大酶用量。 應嚴格控制鹽酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或鹽酸胍高于 0.1M將會降低重組賴氨酰內切酶的活力。


產品用途

|生物制品的生產,如胰島素及類似物生產,GLP-1 類似物生產。 

|小分子蛋白或多肽的生產,如美容肽,抗菌肽、食品風味肽的生產等。 

|Lys-X 化合物的酶催化合成。 

|干細胞、原代細胞的培養,作用更加溫和。



- 運輸和儲存穩定性

運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。 

儲存穩定性:凍干粉在-15~-20℃條件下至少能穩定存放24個月。1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15~-20℃,反復凍融10次,無活性損失。溶解后 2~8℃保存建議不超過7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建議不超過30天 。


- 注意事項和免責聲明

|在 2M 尿素或 0.1%SDS 可保留大部分活力。 

|本品具有吸潮性,應室溫平衡后再取用。 

|本品僅供研究使用,不得用于動物或人類的診斷或治療。






文件下載:
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