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0756-6348118

重組胰蛋白酶(細胞培養級)
日期:2018-08-17    瀏覽次數:


Gebiotide®重組胰蛋白酶(細胞培養級)


產品簡介

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,能選擇地水解蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基末端所構成的肽鏈。本品是從重組畢赤酵母中分離純化,再經冷凍干燥得到的重組胰蛋白酶粉末。本品屬于細胞培養級基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。本品活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如PMSF和TLCK等、金屬離子螯合劑如EDTA等的抑制。



產品優勢

?無動物源性:無動物病毒、無致病物質、無外源因子污染,安全性高。
? 純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
? 符合中國藥典 2020 版和 USP43 的標準。
? 生產規模 1000L 以上。
? 合規性:生產設備和生產環境符合相關法規要求,符合 GMP 指導原則。
? 質量文件完整:按客戶需求,可提供相關法規支持文件



- 產品特性


性狀

白色或類白色凍干粉

分子量

23.5KD±2.4KD

≥95%(SDS-PAGE)

HPLC純

α-胰蛋白酶不得大于20%;

β-胰蛋白酶不得小于70%,

外源DNA殘留量

≤100ng/mg pro.

菌體蛋白殘留量

≤100ng/mg pro.

最佳pH 7.0-9.0

溶解性

在水或緩沖液中可溶

酶活定義: 25℃,pH7.6,反應體系 3.0ml (1cm 光路),

 每分鐘酶解 BAEE 使 253nm 下的吸收值增加 0.003 定義為一個 USP 



產品說明

酶抑制劑:本品不含 DFP,PMSF,TLCK 等酶抑



- 反應規程

蛋白質的準備:

將蛋白質溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質可以用最小體積的 變性劑,如 8M 尿素或 6M 鹽酸胍,在室溫~37℃條件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質 可以加入終濃度為 5mM 的 DTT 或β-巰基乙醇,于 50~60℃孵育 20 分鐘使之溶解。調整反應溶液體積使 Tris-HCl 為 25mM,尿素為 1M 或更低,鹽酸胍為 0.1M 或更低。

酶液準備:

稱取所需的酶粉,用適量緩沖液溶解即得。 

消化反應:

1g 多肽或蛋白質推薦酶的用量在 1~100AU 之間。推薦于-15℃及以下反應 2~18h。 

如果需要終止反應,可以加入乙酸或鹽酸調節 pH 至酸性。


【注意】

為了獲得最佳的酶切效果,通常需要蛋白處于可溶、變性和二硫鍵還原的狀態,否則需要加大酶用量。應嚴格控制鹽酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或鹽酸胍高于 0.1M 將會降低重組賴氨酰內切酶的活力。



- 運輸和儲存穩定性

運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。 

儲存穩定性:凍干粉在-15~-20℃條件下至少能穩定存放24個月。1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15~-20℃,反復凍融10次,無活性損失。溶解后 2~8℃保存建議不超過7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建議不超過30天 。


- 注意事項和免責聲明

|本品具有吸潮性,應室溫平衡后再取用。

|本品不得用于臨床診斷和治療。




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