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重組賴氨酰內切酶(質譜級)
日期:2018-08-08    瀏覽次數:


重組賴氨酰內切酶(質譜級)


產品簡介

賴氨酰內切酶(LaiAnXianNeiQieMei)又稱賴氨酰肽鏈內切酶Lys-C 內切酶,是一種絲氨酸蛋白酶, 最初由Masaki等人從土壤細菌中發現并分離得到。該酶具有高度特異性,可特異性切割賴氨酸殘基和 S-氨乙 基半胱氨酸殘基羧基端的肽鍵。也有報道稱具有微量的非特異性切割。該酶是蛋白質序列分析和生物制品生產 中非常珍貴的工具酶。該酶可單獨使用,也可以與其它蛋白酶一起使用,經過消化的蛋白可用于肽圖譜分析以 及目的蛋白的制備。 本品是從重組大腸桿菌中分離純化,再經冷凍干燥得到的重組賴氨酰內切酶粉末。

本品屬于生物化學級別 的基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有天然賴氨酰內切酶相同的活力和特異性。



產品優勢

|無動物源性:無動物病毒、無致病物質、無外源因子污染,安全性高。 

|純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。 

|生產規模 1000L 以上。 

|合規性:生產設備和生產環境符合相關法規要求,符合 GMP 指導原則。 

|質量文件完整:按客戶需求,可提供相關法規支持文件。



- 產品特性


性狀

白色或類白色凍干粉

等電點

6.9-7.0

分子量為 29.2 kD±2.9kD 的單一主帶(SDS-PAGE)

最佳pH 8.5-9.5

溶解性

在緩沖液中可溶

比活性 不得少于 1.0 AU/mg pro. 

酶活定義:30℃, pH9.5 條件下,每分鐘催化底物生成 1μmol 對硝基苯胺的酶量為 1AU。




產品用途

|酶抑制劑:本品不含 DFP,PMSF,TLCK 等酶抑制劑。


- 反應規程

【蛋白質的準備 】

將蛋白質溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質可以用最小體積的 變性劑,如 8M 尿素或 6M 鹽酸胍,在室溫~37℃條件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質 可以加入終濃度為 5mM 的 DTT 或β-巰基乙醇,于 50~60℃孵育 20 分鐘使之溶解。調整反應溶液體積使 Tris-HCl 為 25mM,尿素為 1M 或更低,鹽酸胍為 0.1M 或更低。 

【酶液準備 】

稱取所需的酶粉,用適量緩沖液溶解即得。 

【消化反應 】

1g 多肽或蛋白質推薦酶的用量在 1~100AU 之間。推薦于-15℃及以下反應 2~18h。 

如果需要終止反應,可以加入乙酸或鹽酸調節 pH 至酸性。 

【注意】 為了獲得最佳的酶切效果,通常需要蛋白處于可溶、變性和二硫鍵還原的狀態,否則需要加大酶用量。應嚴格控制鹽酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或鹽酸胍高于 0.1M 將會降低重組賴氨酰內切酶得活力。


- 運輸和儲存穩定性

運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。 

儲存穩定性:凍干粉在-15~-20℃條件下至少能穩定存放24個月。1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15~-20℃,反復凍融10次,無活性損失。溶解后 2~8℃保存建議不超過7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建議不超過30天 。


- 注意事項和免責聲明

|溫度超過 37℃本品可能發生自我消化。在 2M 尿素或 0.1%SDS可保留大部分活力。

|本品具有吸潮性,應室溫平衡后再取用。

|本品不得用于臨床診斷和治療。




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